Test d’Ames (labo extérieur)

Système biologique exposé

  • Salmonelles (Salmonella typhimurium)

Effets ou modes d’action mis en évidence

  • Altérations héréditaires du patrimoine génétique (effets mutagènes)

Durée

  • 3 j (durée d’exposition: 48 h)

Principe

  • Le test fait appel à un mutant de Salmonella typhimurium (mutant His) devenu incapable de synthétiser l’histidine et donc inapte à se développer sur milieu de culture privé de cet acide aminé.
  • Au contact de substances mutagènes, les bactéries mutantes peuvent subir des mutations réverses qui leur restituent leur capacité à synthétiser l’histidine.
    Ces mutants réverses sont à nouveau capables de se développer sur milieu sans histidine.
  • Plus le taux de colonies de mutants réverses est important parmi les bactéries exposées, plus le potentiel mutagène des substances testées est élevé.

Intérêt

  • Permet la détection rapide d’un potentiel mutagène chez les substances ou mélanges testés (rapidité de multiplication des bactéries donc rapidité d’obtention de mutations)
  • Facilité de détection des quelques mutants parmi la multitude de cellules restées intactes.

Mais:

  • Méthode in vitro: Le comportement des substances dans les organismes complexes comme ceux des mammifères ne peut être simulé avec exactitude (simulation partiellement possible par apport de S9 Mix, un extrait de foie renfermant des enzymes du métabolisme à imiter)
  • Un effet mutagène sur les bactéries n’implique pas nécessairement d’effet mutagène sur les mammifères
  • Différence de complexité entre les bactéries et les cellules de mammifères (ces dernières disposent de systèmes capables de détecter les anomalies dans l’ADN et de détruire ou d’empêcher la multiplication des cellules touchées ; les bactéries sont des organismes unicellulaires)

Normes et références

  • Norme DIN: Deutsches Institut für Normung (1999). Deutsche Einheitsverfahren zur Wasser-, Abwasser- und Schlammuntersuchung - Suborganismische Testverfahren (Gruppe T) - Teil 4: Bestimmung des erbgutverändernden Potentials mit dem Salmonella-Mikrosomen-Test (Ames Test) (T 4). DIN 38415-4.
  • Norme ISO: International Organization for Standardization (2005). Water quality -- Determination of the genotoxicity of water and waste water -- Salmonella/microsome test (Ames test). ISO 16240, 20 p.